武漢泰特沃斯科技有限公司為您提供C18液相色譜柱的使用及維護方法。在選擇色譜柱之前，先多了解自己的樣品和雜質(zhì)，他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等，
1.樣品是極性的且弱酸性的；就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測，即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱
2. 如果樣品極性太強，或酸性太強；可以選擇CN，NH2，或硅膠柱，HILIC親水色譜，也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱缺點是離子對試劑平衡時間長，對流動相pH要求比較精密，否 則很難重復(fù)實驗，另外離子對試劑很難洗下來，基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗
3. 若樣品是堿性的；可選擇高純硅膠柱高純硅膠缺少金屬雜質(zhì)，且硅膠端基封尾或一些經(jīng)過修飾的C18柱如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等，他們都會減少堿性化合物的拖尾，一般會選擇中性或偏堿的條件下做，因為這樣可增加堿性樣品的保留。
4.如果堿性化合物的極性太強，或堿性太強；可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測優(yōu)點是方法開發(fā)簡單，缺點是目前實 現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少，價格也高或者選用HILIC色譜柱硅膠柱在反相條件下使用，這也是很經(jīng)典的檢測堿性樣品的方法選擇強離子交換柱缺點 是不能用來分析其它樣品，對流動相pH要求比較精密，否則很難重復(fù)實驗也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱。
C18柱是一種常用的反相色譜柱，它以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，因此有較高的碳含量和更好的疏水性，對各種類型的生物大分子有更強的適應(yīng)能力，適用范圍較廣，是液相色譜儀分析中可以選擇]的色譜柱類型。
在使用液相色譜C18儀柱過程中，須注意以下事項:
1、新C18色譜柱在使用前，須先用甲chun或yi腈試劑以20倍柱體積低流速沖洗，作用是使固定相能充分潤濕、碳鏈舒展，使色譜柱的性能達到好狀態(tài)。具體操作是，將配制好65%的yi腈/水沖洗后，把色譜柱進口端連接在色譜儀上，出口端放空不可連上檢測器，以免污染了檢測器，以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速將色譜柱中的清稀溶液吹干，過20分鐘后再接上檢測器，以1.0ml/min的流速，繼續(xù)沖洗2~8小時；
2、液相色譜儀檢測分析樣品完畢后，須沖洗色譜柱。尤其是流動相中含有酸或鹽時，需將色譜柱中的酸或鹽沖洗干凈，通常建議用10%甲chun水沖洗20倍柱體積；
3、若色譜柱處于長期閑置狀態(tài)時，要將色譜柱沖洗，建議沖洗3-4小時以上，后保存在純有機試劑或高比例的有機試劑溶液如90%甲chun水中；
4、由于C18柱的固定相疏水性較強，在使用過程中盡量不要使用高水相條件，若水相比例過高易引起固定相疏水塌陷，引起柱效迅速下降，甚至造成不可逆的負面影響；由于碳載量高，表現(xiàn)尤為明顯，建議使用過程中水相比例不超過90%；
5、色譜柱壓力升高、柱性能下降:通常為色譜柱被污染，對色譜柱進行再生處理可恢復(fù)部分柱效；
6、色譜柱壓力驟升:通常由鹽析出或篩板堵塞引起，若是鹽析出，用10%甲chun水低流速沖洗至壓力恢復(fù)即可；若判斷并非鹽析出，以純甲chun或10%甲chun水為流動相反沖色譜柱將色譜柱反接，不接檢測器，若反沖半小時仍無效果則說明反沖無效，需尋找其他原因。